益气活血通络方下调TGF-β/ERK信号通路对蛛网膜下腔出血大鼠的神经保护作用

目的探讨益气活血通络方对蛛网膜下腔出血大鼠TGF-β/ERK信号通路的影响及神经保护作用。方法 SD大鼠随机分为假手术组,模型组,益气活血通络方5、10、15 g/kg组和尼莫地平组,除假手术组外,其余各组建立蛛网膜下腔出血模型大鼠,分组处理后,各组大鼠进行神经功能缺损评分;以伊文思蓝染料外渗实验检测大鼠血脑屏障通透性;以TUNEL染色检测大鼠脑皮质神经细胞凋亡情况;以酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;以蛋白免疫印迹法检测大鼠脑皮质组织TGF-β/ERK通路相关蛋白TGF-β1、p-ERK/ERK表达情况。结果与假手术组相比,模型组大鼠神经功能缺损评分、伊文思蓝渗出量、TUNEL阳性细胞比例、血清IL-6、TNF-α水平、TGF-β1表达、p-ERK/ERK明显升高(P0.05)。与模型组相比,益气活血通络方5、10、15 g/kg组和尼莫地平组大鼠神经功能缺损评分、伊文思蓝渗出量、TUNEL阳性细胞比例、血清IL-6、TNF-α水平、TGF-β1表达和p-ERK/ERK水平明显降低(P0.05),且益气活血通络方各组呈剂量相关性,益气活血通络方15 g/kg组与尼莫地平组相比,各指标比较差异无统计学意义。结论益气活血通络方可下调TGF-β/ERK信号,保护蛛网膜下腔出血大鼠神经功能。     

HPV检测原发灶不明颈淋巴结转移癌的诊断作用初探(附6例报告)

目的 初步探讨HPV检测在诊断原发灶不明的颈淋巴结转移性鳞癌中的价值。方法 收集复旦大学附属肿瘤医院6例首诊为原发灶不明的颈淋巴结转移性鳞癌,最终确诊为HPV相关口咽鳞癌,分析确诊过程。结果 首诊时6例患者均被确诊为颈淋巴结转移性鳞癌,且p16表达阳性和HPV-16亚型阳性,而EBER表达阴性。经全面检查均未发现明显的原发病灶。随后对其中4例予同侧扁桃体盲检(2例)和切除(2例),病理均证实为扁桃体鳞癌。另2例分别在随访第149天、545天MRI检查发现同侧口咽侧壁和舌根增厚伴强化,经活检分别证实为扁桃体鳞癌、舌根鳞癌。结论 对于原发灶不明的HPV阳性颈淋巴结转移性鳞癌,应高度怀疑原发病灶来源于口咽部位的可能性,特别是扁桃体和舌根部位。     

The Comprehensive Analysis of Efficacy and Safety of CalliSpheres^® Drug-Eluting Beads Transarterial Chemoembolization in 367 Liver Cancer Patients: A Multiple-Center,Cohort Study

This study aimed to investigate the efficacy, safety, and prognostic factors of drug-eluting beads transarterial chemoembolization (DEB-TACE) in treating Chinese patients with liver cancer. A total of 367 liver cancer patients from 24 medical centers were consecutively enrolled in this multiple-center, prospective cohort study, including 275 hepatocellular carcinoma (HCC) cases, 37 intrahepatic cholangiocarcinoma (ICC) cases, and 55 secondary liver cancer cases. All the patients received CalliSpheres^® DEB-TACE treatment. Treatment response, overall survival (OS), change of liver function, and adverse events (AEs) were assessed. DEB-TACE treatment achieved 19.9% complete response (CR) and 79.6% objective response rate (ORR), with mean OS of 384 days [95% confidence interval (CI): 375–393 days]. CR and ORR were both higher in HCC patients compared with primary ICC patients and secondary liver cancer patients, while no difference was discovered in OS. Portal vein invasion was an independent risk factor for CR, while portal vein invasion, previous conventional TACE (cTACE) treatment, and abnormal blood creatinine (BCr) were independent risk factors for ORR. In addition, largest nodule size 5.0 cm, abnormal albumin (ALB), and abnormal total bilirubin (TBIL) independently correlated with unfavorable OS. Most liver function indexes were recovered to baseline levels at 1–3 months after DEB-TACE. Common AEs were pain, fever, vomiting, and nausea; most of them were at mild grade. CalliSpheres^® DEB-TACE is efficient and well tolerated in Chinese liver cancer patients. Portal vein invasion, previous cTACE treatment, largest nodule size, abnormal BCr, ALB, and TBIL correlate with worse prognosis independently.     

伞骨草利尿抗炎活性及急性毒性研究＊

目的 研究伞骨草水提物的利尿和抗炎作用，以及利尿后对电解质平衡、糖代谢及肾脏功能的影响，并对伞骨草水提物安全性进行初步评价。方法 采用小鼠代谢笼法，检测盐水负荷小鼠在给药6 h后的排尿量，并分析小鼠尿液中离子浓度、血清中糖原、尿素氮和肌酐的变化；采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法，计算耳廓肿胀度及肿胀抑制率，角叉菜胶致大鼠足趾肿胀法，计算足趾肿胀率，小鼠急性毒性试验初步评价伞骨草水提物的安全性。结果 与对照组比较，伞骨草水提物能明显增加小鼠的排尿量，尿液中K⁺、Cl^-的浓度明显增加，高剂量组Na⁺、Ca²⁺浓度明显增加；伞骨草对小鼠血清中的糖原、尿素氮和肌酐均无明显影响；伞骨草中、高剂量对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶所致大鼠足趾肿胀具有明显的抑制作用；伞骨草水提物24 h内小鼠单次灌胃给药急性毒性试验的LD₅₀为：12.33 g·kg^-1（相当于生药82.15 g·kg^-1），动物在4 h内出现毒性反应，主要表现为主要表现为腹泻、俯卧、竖毛、运动失调、死亡，腹泻至给药第2天恢复。结论 伞骨草水提物具有明显的利尿和抗炎作用，并且对机体的血糖水平和肾脏功能无明显影响。     

基于ML-kNN多标记学习的中医体质辨识模型研究

目的 中医体质与人体健康状态密切相关。研究利用人工智能技术辨识中医体质，为中医体质辨识智能化及自动化发展提供新思路。方法 以江苏省中医院体检中心的中医体质数据作为初始数据样本，经过数据清洗、过滤及结构化最终纳入9844条数据作为研究对象，运用ML-kNN多标记k近邻算法构建中医体质辨识模型，使用10折交叉验证训练模型，并采用多标记学习评价指标评估模型效果。结果 中医体质辨识模型的平均汉明损失为0.096 1，平均1-错误率为0.126 1，平均排序损失为0.086 6，平均覆盖率为1.153 5，平均精度为88.57%。结论 基于体检中心中医体质辨识量表数据，利用ML-kNN多标记学习算法，构建体质辨识模型，能够有效实现中医体质辨识智能化。     

抗PD-1/PD-L1免疫检查点抑制剂的皮肤免疫相关不良反应的研究进展

随着免疫检查点抑制剂（immune checkpoint inhibitors，ICPI）在国内外临床试验和应用中的逐步推广，越来越多的患者从免疫治疗中获得显著的疗效。其中抗程序细胞死亡蛋白1（programmed death-1，PD-1）及其配体（PD-1 ligand，PD-L1）免疫检查点抑制剂已被美国食品药品管理局（FDA）批准用于恶性黑色素瘤、转移性鳞状非小细胞肺癌、晚期肾癌、头颈鳞状细胞癌、尿路上皮癌等肿瘤的治疗。但PD-1/PD-L1单抗也会引起免疫相关性皮肤、消化道、肝脏、内分泌、肺部等器官的不良反应，皮肤毒性如皮疹、白癜风、皮肤干燥症等是最常见也是最早发生的不良反应。     

PFKFB3参与脂多糖诱导肺成纤维细胞及肺组织有氧糖酵解的观察性研究

目的:观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导肺成纤维细胞及肺组织有氧糖酵解关键酶6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3,PFKFB3)表达及其与有氧糖酵解的关系,探讨在LPS诱导肺纤维化过程中肺成纤维细胞和肺组织有氧糖酵解的潜在机制。方法:将人胚肺成纤维细胞MRC-5细胞系采用随机数字表法分为PBS对照组(PBS组)和LPS组(每组3孔),Western blot检测LPS刺激细胞6h后PFKFB3表达情况,同时免疫荧光显示PFKFB3在细胞内的定位情况;于LPS刺激后48 h采用海马细胞能量代谢仪检测细胞耗氧率(oxygen consumption rate,OCR)和产酸率(extracellular acidification rate,ECAR),并采用比色法检测有氧糖酵解产物乳酸产生情况,同时Western blot检测LPS刺激48 h后Ⅰ型胶原蛋白合成情况。将24只C57BL/6小鼠按随机数字表法分为生理盐水对照组(C组)、LPS组(L组),每组12只,L组、C组连续5d分别腹腔注射5 mg/kg LPS、等容量生理盐水;每组各6只于造模后第7天无痛处死小鼠,取血浆和肺组织,Western blot和免疫荧光检测各组肺组织中PFKFB3表达情况,比色法检测各组小鼠血浆中乳酸的含量;剩余小鼠于造模后第28天取肺组织,一侧肺通过Western blot检测肺组织Ⅰ型胶原蛋白合成情况,另一侧肺做石蜡切片进行病理学检测。结果:与PBS组比较,LPS刺激细胞6h后PFKFB3表达明显升高(P<0.05);LPS刺激细胞48 h后,与PBS组比较,LPS组细胞耗氧率降低、产酸率增加,代谢产物乳酸含量明显升高(P<0.05),同时细胞Ⅰ型胶原蛋白合成显著增加(P<0.05)。与C组比较,L组小鼠腹腔注射LPS 7 d后肺组织中PFKFB3表达明显升高(P<0.05),血浆乳酸含量明显升高(P<0.05);LPS注射28 d后,L组小鼠Ⅰ型胶原蛋白表达明显升高(P<0.05),肺组织出现明显纤维化。结论:在LPS诱导的肺纤维化过程中,LPS可诱导肺成纤维细胞和肺组织中PFKFB3蛋白表达,该过程与其有氧糖酵解过程相关,PFKFB3的表达上调可能是LPS诱导肺成纤维细胞和肺组织有氧糖酵解和肺纤维化的关键环节。     

青霉素杂质谱分析方法的优化与转换

目的建立青霉素杂质谱HPLC分析方法,并将其转换成UPLC/UHPLC方法。方法以青霉素混合降解溶液为样品;首先分析《中国药典》(2010年版,ChP2010)方法甲醇-缓冲盐二元流动相色谱系统的缺陷;再利用实验设计理念,以响应曲面法(response surface methodology,RSM)的中心组合设计(central composition design,CCD)对色谱系统进行优化,满意度函数法确定最优色谱条件,并优化梯度洗脱条件;最后,利用软件对HPLC方法的流速、进样体积和梯度时间进行几何缩放,并通过色谱柱的选择,将其分别转换为UPLC方法和UHPLC方法。结果新HPLC方法:色谱柱为Capcell Pak C18 MGII(4.6mm×250mm,5μm),流速:1.0m L/min,进样体积:20μL;UPLC方法:色谱柱为Cortecs C18(2.1mm×100mm,1.6μm),流速:0.35m L/min,进样体积:2.0μL;UHPLC方法:Cortecs C18(4.6mm×150mm,2.76μm),流速:0.8mL/min,进样体积:10μL。3种方法的检测波长均为225nm,柱温均为34℃;流动相A均为磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾10.6g,加水至1000mL,用磷酸调pH至3.4)-甲醇(72:14,V/V),流动相B均为乙腈;均为梯度洗脱,但梯度洗脱表不同。结论 3个色谱系统的分离效果(出峰顺序和个数)相似。新HPLC方法可以分离出更多的降解杂质,并明显改善了青霉素峰的拖尾,缩短了分析时间。